PCR பகுப்பாய்வு என்றால் என்ன?
பாலிமரேஸ் சங்கிலி எதிர்வினை (பிசிஆர்) பகுப்பாய்வு என்பது ஒரு மாதிரியில் சிறிய அளவிலான டி.என்.ஏவை அடையாளம் காணும் ஒரு செயல்முறையால் கண்டறிய வடிவமைக்கப்பட்ட ஒரு ஆய்வக நுட்பமாகும். பி.சி.ஆர் பெருக்கத்தின் போது, பகுப்பாய்வு மற்றும் கண்டறிதல் ஆகியவற்றிற்கு போதிய அளவு வரை டி.என்.ஏ வட்டி மீண்டும் மீண்டும் நகலெடுக்கப்படுகிறது. உதாரணமாக, சிறுநீரகம் அல்லது கிளாமியாவை சிறுநீரில் மாதிரியாகக் கொண்டிருக்கும் உயிரினங்களிலிருந்து சிறிய அளவிலான டி.என்.ஏவை கண்டறிய PCR பயன்படுத்தப்படலாம்.
PCR எப்படி வேலை செய்கிறது?
பி.சி.ஆரில் முதல் படி இரட்டை மாதிரியான டி.என்.ஏ இரண்டும் இரண்டு ஒற்றைத் திசையன்களாக பிரிக்கப்படுவதன் மூலம் மாதிரியை வெப்பமாக்குவதாகும் - இது குணப்படுத்துதல் என்று அழைக்கப்படுகிறது. டி.என்.ஏ வரிசையின் வட்டிக்கு முந்திய டி.என்.ஏவின் முதன்மையான , சிறிய மாதிரிகள், மாதிரி டி.என்.ஏ உடன் இணைந்துள்ளன. இதன் பிறகு, டி.என்.ஏ பாலிமரேஸ் டி.என்.ஏ. சிதைவை ஆரம்பிக்கும் இடத்தில் பயன்படுத்தப் பயன்படுகிறது. இறுதியாக, டி.என்.ஏ பிணங்களை பிரிக்க இன்னும் சூடாகிறது, முழு PCR செயல்முறையும் தொடங்குகிறது.
ஒவ்வொரு பி.சி.ஆர் சுழற்சியிலும் மாதிரியான டிஎன்ஏ பிரிவின் வட்டி அளவு அதிகரிக்கிறது: ஒரு நகல் இரண்டு ஆகிறது, பிறகு நான்கு ஆகிறது, பிறகு எட்டு, எட்டு; பொதுவாக, டி.என்.ஏ கேள்வி இருந்தால் (மற்றும், இருந்தால், ஆய்வுக்கு போதுமான மாதிரியை வழங்கினால்) தீர்மானிக்க 20 அல்லது 40 சுழற்சிகள் மட்டுமே தேவைப்படுகின்றன.
டி.என்.ஏவைக் குறைத்து , டி.என்.ஏவைத் துல்லியமாகவும் , டி.என்.ஏவை நீட்டவும் - வெவ்வேறு வெப்பநிலைகளில் நடக்கும், ஆரம்ப கலவையை ஒன்றாகச் சேர்த்து, தெர்மோசைக்கிங் என்று அழைக்கப்படும் செயல்முறை மூலம் படிகள் கட்டுப்படுத்தப்படும், பாலிமரேஸ் சங்கிலி எதிர்வினை அனைத்து வழிமுறைகளும், இதில் ஒவ்வொரு படியிலும் நடக்க வேண்டிய அளவுக்கு தேவையான அளவுகளில் வெப்பநிலை நடைபெறுகிறது.
எனவே, பிசிஆர் ஒரு டிஜிட்டல் டி.என்.ஏயின் அளவுகளை டி.என்.ஏ அளவுக்கு அதிகப்படுத்தும் ஒரு திறமையான வழியாகும்.
பாலிமரேஸ் சங்கிலி எதிர்வினை உயிரியல் தொழில்நுட்பத்தில் ஒரு புரட்சியை பிரதிநிதித்துவப்படுத்தியது, அது 1980 களின் ஆரம்பத்தில் உருவாக்கப்பட்டது, மற்றும் பி.சி.ஆர் உருவாக்கிய கரி முல்லிஸ் 1993 ஆம் ஆண்டில் தனது வேதியியல் வேதியியல் நோபல் பரிசு பெற்றார்.
எஸ்.சி.டி. சோதனைக்கு பி.சி.ஆர் ஏன் பொருத்தமானது?
பாலிமரேஸ் சங்கிலி எதிர்வினை, மற்றும் லைகஸ் சங்கிலி எதிர்வினை போன்ற தொடர்புடைய நுட்பங்கள், STD சோதனைக்கு முக்கியத்துவம் வாய்ந்ததாக நிரூபிக்கப்படுகின்றன. இந்த உத்திகள் நேரடியாக சிறிய அளவில் வைரஸ் டி.என்.ஏ அல்லது ஆர்என்ஏ மாதிரியில் அடையாளம் காணலாம். ஒரு நோய்க்கிருமி மரபணு குறியீட்டை அடையாளம் காண்பது நோய்க்கு உயிரியல் தேவை இல்லை - பாக்டீரியா கலாச்சாரம் அல்லது வைரஸ் கலாச்சாரம் போன்றது. இது தொற்றுநோயானது நீண்ட காலத்திற்கு முன்பு மக்கள் தொற்றுநோயான ஆன்டிபாடி எதிர்வினை ( ELISA ஆல் கண்டறியப்பட்டது போன்றவை) உருவாக்கியிருக்க வேண்டும் என்பதற்கும் இது தேவையில்லை. இதன் பொருள் பி.சி.ஆர் நுட்பங்கள் சில நேரங்களில் பிற சோதனைகள் விட நோய்களைக் கண்டறிவதுடன், மாதிரிகள் உயிருடன் அல்லது சரியாக சரியான நேரத்தில் பரிசோதித்தல் பற்றி கவலைப்பட வேண்டியது அவசியம்.